TITULO: IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR, ASPECTOS FENOTÍPICOS E PERFIL DE SENSIBILIDADE DE ISOLADOS DE TRICHOSPORON, CUTANEOTRICHOSPORON E APIOTRICHUM AOS ANTIFÚNGICOS COMERCIAIS E AO ÓLEO ESSENCIAL DE SYZYGIUM AROMATICUM (CRAVO-DA-ÍNDIA) EXTRAÍDO POR FLUIDO SUPERCRÍTICO

Aluna: ELAINE PATRÍCIA TAVARES DO ESPÍRITO SANTO

Orientadora: Profa. Dra. SILVIA HELENA MARQUES DA SILVA

Resumo:

Trichosporon passou por várias revisões e sua taxonomia foi modificada progressivamente. A identificação de espécies é difícil e necessita tanto de observações morfológicas quanto de identificação bioquímica, que às vezes são inconclusivos, por isso, é necessário buscar outras ferramentas, como a Biologia Molecular. Faltam testes padronizados para avaliar suscetibilidade antifúngica, porém geralmente os dados descritos corroboram entre si. Atualmente, o uso de plantas medicinais vem se tornando uma prática constante. Syzygium aromaticum, conhecido como cravo-da-índia, está sendo bastante estudado nos últimos anos e demonstrando atividades sobre bactérias e fungos. Através da Extração por Fluido Supercrítico (EFS), técnica “verde”, barata e que não produz resíduos tóxicos, podemos obter excelente óleo essencial (OE) do cravo-da-índia. Nosso objetivo foi identificar molecularmente, avaliar os aspectos fenotípicos e determinar a sensibilidade de isolados de Trichosporon, Cutaneotrichosporon e Apiotrichum aos antifúngicos comerciais e ao óleo essencial de Syzygium aromaticum (cravo-da-índia) extraído por Fluido Supercrítico. Neste trabalho, 26 isolados clínicos foram identificados como pertencentes aos gêneros Trichosporon, Cutaneotrichosporon e Apiotrichum através do sequenciamento da região Intergenic spacer 1 (IGS1). Observamos o desenvolvimento colonial ideal entre 35 e 40°C. A lipase foi a principal enzima extracelular produzida (100%) e caseinase não foi produzida (0%). Todos os isolados foram capazes de produzir biofilme, porém foram classificados como baixo. A suscetibilidade a antifúngicos foi determinada pelo método de microdiluição em caldo do CLSI para fluconazol (FLC), itraconazol (ITC) e anfotericina B (AMB). Elevada CIM para AMB, com todas as cepas resistentes e FLU foi à droga mais ativa entre os antifúngicos testados. Identificamos 15 componentes do OE, sendo o eugenol (60%) o principal composto. Este OE apresentou baixa porcentagem de hemólise, e o método de disco-difusão revelou elevado halo de inibição, variando de 21 a 37 mm, com CIM variando de 2 mg/mL a 174 mg/mL. A suscetibilidade dos biofilmes ao OE demonstrou CIM variando de 69,5 a 347,5 mg/mL. Além disso, o OE inibiu o desenvolvimento do biofilme ao ser utilizado no tratamento prévio da amostra. Este estudo permitiu observar a atividade antifúngica do OE de S. aromaticum contra espécies clinicamente relevantes, indicando o elevado potencial deste composto, como opção terapêutica no tratamento de infecções fungicas.

Palavras-chave: Trichosporon; Biologia Molecular; Suscetibilidade Antifúngica; Extração por Flúido Supercrítico; Syzygium aromaticum.

Banca Examinadora:

Profa. Dra. ANA PAULA DRUMMOND RODRIGUES

Profa. Dra. CINTYA DE OLIVEIRA SOUZA

Profa. Dra. LUANA NEPOMUCENO COSTA LIMA

Profa. Dra. MIONE THIELI FIGUEIREDO MAGALHÃES DE BRITO

Profa. Dra. KARLA VALÉRIA BATISTA LIMA (Suplente)

LOCAL: Sala de estudo do Restaurante – IEC – Campus Ananindeua

DATA: 21/02/2020

HORA: 8:30H